Windowsで、Expression Web4を使用して、透過GIFを作成することができます。Expression Web4はフリーソフトで、こちらよりダウンロードできます。
ダウンロードした実行ファイルをクリックすると以下のような画面が表示されますので、「Accept」をクリックします。



次に、「No」にして、「Next」をクリックします。



次に、「Install」をクリックします。



インストールが完了したら、以下の画面が表示されますので、「Finish」をクリックしてインストール完了です。

Expression Web4を起動したら、「Insert」 - 「Picture」 - 「From File」から透過GIFにしたいファイルを選択します。



選択すると、画像が表示されますので、「View」 - 「Toolbars」 - 「Pictures」にチェックを入れます。



これでPicuturesバーが表示されるので、以下のアイコンをクリックし、画像の透過にしたい場所をクリックします。



これで「File」 - 「Save」すると、default.htmlと画像ファイルが保存されます。これで画像が透過GIFになっています。